培養(yǎng)基過濾器適用于對配制的細胞、組織培養(yǎng)液進行除菌過濾的器材。過濾器根據(jù)原理不同可以分為負壓真空式、正壓桶式、正壓平板式。不同種類的濾器由于其結(jié)構(gòu)、原理的不同,故而適宜于針對不同使用場景、不同過濾量用戶。今天我們會議圣斯特Sciencetool品牌的一款FH-P5A瓶頂式負壓真空過濾器為例,來說明該原理的濾器適用的范圍,以及具體使用方法。
FH-P5A主體結(jié)構(gòu)分為2個部分,黃色透明塑料濾杯和白色帶吸嘴的過濾基座。過濾基座下面帶有GL45的內(nèi)螺紋,可以直接擰在藍蓋玻璃試劑瓶上。基座的上半部分為旋卡式結(jié)構(gòu),帶有一片濾膜支撐片,過濾前可以將0.22微米濾膜平鋪在基座上,并將黃色濾杯放入旋轉(zhuǎn)卡緊。裝好后可以整體放入高溫高壓滅菌鍋進行滅菌處理。滅菌結(jié)束后使用泵管插入白色基座側(cè)邊的連接嘴上。下面是過濾器的詳細特點:
1.過濾器采用PES聚醚砜材質(zhì)制作,整體均可以進行121度高溫高壓滅菌后反復使用。
2.可以搭配任意品牌的過濾膜使用,兼容直徑47和50mm濾膜,不限制濾膜的材質(zhì)和孔徑,可根據(jù)使用的實際需要來選擇。
3.濾器底部為GL45螺紋口,可以和任意品牌的藍蓋試劑瓶連接搭配使用,過濾結(jié)束后取下漏斗,蓋上試劑瓶蓋就可以保存濾液,避免二次污染的同時操作也十分簡便。
4.濾杯容量為500ml,杯身帶有刻度線,刻度線和濾杯采用模具一體注塑成型,不同于后期印刷的工藝,一體成型可以確保常年使用,刻度線始終如全新品一樣不會退變消失。
5.特別設(shè)計了一款自動進液蓋,過濾時蓋上杯蓋,將進液管一頭接在濾杯蓋上,另一頭放入待過濾液體中,打開抽濾泵后,就可以自動將液體吸入濾杯內(nèi)并通過濾膜。自動進液省時省力,可以不需要手工倒液,過濾過程中也不需要人工照看。
6.濾杯和濾膜放置基座采用旋卡式設(shè)計,只需要把濾杯放入濾膜基座輕輕旋轉(zhuǎn)就可以使兩部分連接緊密,不會漏液漏氣。該設(shè)計不需要使用夾具或卡箍來固定,單手即可操作換膜,更加便利、密封性更佳。
在了解了過濾器的特點后,下面是具體的操作和使用方法:
a.檢查組織培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)接過濾座的濾膜墊片是否已安裝;若有若有掉落,請依<圖 3b>將過濾膜墊片放到過濾基座中,并用力下壓讓墊片可以卡住。
b.將組織培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)接過濾座接到組織培養(yǎng)瓶的瓶口上,以順時針方向?qū)⒔M織培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)接過濾座旋緊。
c.用鑷子將47 mm或50 mm的濾膜放到組織培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)接過濾座濾膜墊片的上方,并保持在組織培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)接過濾座的中間位置。
d.將過濾杯放置于濾膜的上方,再以順時針方向輕輕的旋緊,讓過濾杯卡住過濾基座。
e.將要過濾的樣品倒入過濾杯中,過濾過程中如需要接觸的空氣是干凈無菌,請在漏斗蓋上插上0.2 µm的過濾器,并將漏斗蓋蓋到過濾杯上。
f.啟動抽濾泵進行過濾,等待過濾完成后將真空幫浦關(guān)閉,并轉(zhuǎn)動真空泵上的調(diào)壓閥慢慢的將殘留的真空泄掉。
g.將過濾杯從組織培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)接過濾座上以反時針方向旋開,請依實驗程序進一步處理濾膜。
h.再依實驗程序進行收集,分析或處理瓶內(nèi)的溶液。
i.完成過濾實驗后,請將過濾漏斗的零組件,依照維護方法立刻進行清潔處理。